면역학 실험 실습

소개

면역학 실험 실습 후 작성한 보고서
-5 차례의 세부 실험 포험-
1. mouse에 1차 항원과 adjuvant 주입
2. DELFIA
3. Flow cytometer로 T cell population 분석
4. mouse에 2차 항원 주입
5. ELISA

목차

<면역학 실습 개요>
1. 항체 생산


2. 항체 생산 여부 확인


3. 항체 생산 여부 확인 방법(면역분석법)
- ELISA
- DELFIA

4. INJECTION 방법
- IM(Intra Muscular): 근육주사

- IV(Intra Vein): 정맥주사

- IP(Intra Peritoneal): 복강주사

- ID(Intra Dermal): 피내주사

5. Flow cytometer
 

본문내용

실험결과

FCA를 넣지 않고 I.P.의 방법으로 항원이 주입된 mouse의 경우를 제외하고는 항혈청 농도의 감소에 따른 OD값 감소를 관찰할 수 있음. FCA없이 I.P.의 방법을 사용한 경우 OD값이 거의 linear하게 나온 것은 adjuvant의 부재로 설명할 수 있고, Adjuvant를 넣지 않은 S.C.로 주입된 경우에 미미하게나마 titeration curve 값이 나온 mouse를 특이한 경우로 볼 수 있음.


위에서부터 차례로 S.C. w/ adjuvant, I.P. w/ adjuvant, S.C. w/o adjuvant를 의미함. Linear를 띤 mouse의 값은 제외함. OD값이 0.02 일때의 dilution factor를 titer로 정하는 약속에 의해 결과를 분석해보면 S.C. w/ adjuvant의 경우 64,000x, IP w/adjuvant의 경우 8,000x, S.C. w/o adjuvant의 경우 8,000x를 titer로 정할 수 있음.

FCA 즉 Adjuvant가 있어야 항체가 잘 생김. Adjuvant가 있어야 항체가 생기고 만일 adjuvant없이 injection을 해 항체가 생기지 않아 이 과정을 지속적으로 반복할 경우 tolerance가 생겨 주입된 항원을 자기(self)로 인지해 항체가 더 생기지 않는 결과를 맞게 됨.

실험 후 discussion
이론대로라면 IP로 injection한 mouse의 면역반응이 SC로 injection한 mouse보다 더 빠른 면역반응을 보여야 함. 왜냐하면 SC의 경우 피하지방 때문에 면역세포가 도달하는 시간이 더 걸리기 때문. 하지만 우리 조의 경우 FCA를 넣고 IP의 방법으로 injection된 mouse보다 FCA를 넣고 SC의 방법으로 injection된mouse의 경우가 더 많은 항체를 갖는 결과가 나타남. 이 결과에 대해서는 몇 가지 설명이 가능함. 첫째, 두 mouse모두 injection외의 다른 조건을 동일하게 통제했다고 할 지라도, 두 mouse가 서로 다른 개체이기 때문에 면역능력이 다를 수 있음.

참고자료

· 없음