alkaline lysis

소개

alkaline lysis,분자생물학

목차

<예비 보고서>
Alkaline Method : 플라스미드 DNA의 소량추출법
▶균주의 배양
▶Plasmid의 분리
▶Alkaline Method에서 쓰이는 배지와 시약의 역할
※참고자료

본문내용

<예비 보고서>
Alkaline Method : 플라스미드 DNA의 소량추출법
기본적인 원리는 세균의 세포벽과 세포막을 부수고 DNA만을 분리하는 것이며, 이 때 중요한 점은 세균이 갖고 있는 염색체 DNA와 플라스미드 DNA를 구분하여 분리하는 것이다. 이들은 모두 DNA 이므로 구분하여 분리하기가 쉽지는 않으나 염색체 DNA는 상대적으로 플라스미드에 비해 매우 크기 때문에 이런 성질을 이용하면 분리할 수 있다.

▶균주의 배양
*Selection agent로 ampicillin을 사용하고 LB medium을 사용할 경우.
1. 얻고자 하는 plasmid DNA로 형질전환된 E. coli 균주를 LB (MM 002-01)
+ ampicillin (100 μg/ml) agar plate에 streaking한다.
2. 37°C 배양기에서 overnight 배양한다.
이 성분들은 혈청 농도가 낮아질 때 특히 필요한 성분들이며, 동물 세포의 클로닝을 도와주기도 한다.
3. Overnight 배양한 E. coli 균주의 colony 한 개를 취해 2 ml의 LB+ampicillin (100 μg/ml) broth에 접종한다.
4. 37°C에서 overnight 진탕 배양한다 (200 rpm).

참고자료

· http://blog.naver.com/dongjin_k_?Redirect=Log&logNo=130033344674
· http://blog.naver.com/pow1987?Redirect=Log&logNo=51856451