[미생물실험]transformation 실험(형질전환 실험)/ color selection

소개

미생물실험>transformation 실험/ color selection
형질전환실험

목차

1. 제목( Subject )
2. 실험목적(purpose)
3. 재료 및 기구 ( Material and Apparatus )
4. 실험방법 ( Methods )

본문내용

먼저, Lac operon에 대해 간단하게 설명하면 Lac operon은 박테리아에서 시행되는 유전자 발현 조절 기구이다. 조금더 자세하게 설명을 하면 Lac operon은 E. coli가 lactose를 galactose와 glucose로 분해하는데 필요한 효소인 beta-galactosidase를 만드는 유전자이다.
Lactose가 없을 때에는 불필요한 유전자인 beta-galactosidase는 생성되지 않는다. 그 이유는 유전자의 앞쪽에 있는 inhibitor region에서 생성된 inhibitor가 promotor 영역의 operator 부분에 결합해 RNA polymerase의 활동을 방해하여 beta-galactosidase가 생성되지 않도록 하기 때문이다. 그러나 lactose가 배지에 있으면 이 물질이 inhibitor와 결합하여 operator에서 떼어내게 된다. 따라서 RNA polymerase가 작용하여 mRNA를 만들고, beta-galatosidase를 만들면서 lactose를 분해한다. 그 후 lactose가 다 분해되면 inhibitor가 다시 붙어 유전자는 turn off 된다.
따라서 LacZ 부분을 plasmid에 삽입하여 이러한 유전자 조절 기구를 실험에 이용하는데, 이 때 LacZ operon의 동작 여부를 확인하기 위해서 IPTG와 X-Gal을 사용한다. IPTG는 LacZ gene inducer 역할을 하여, Lactose 대신 inhibitor와 결합하지만 분해되지는 않는다.

참고자료

· 1. 김선희외 7인(2003), 미생물학실습, 서울, 도서출판 고려의학
· 2. 김영권외 25명(2007), 미생물학실험, 서울, 고려의학
· 3. http://cafe.naver.com/gaury.cafe?iframe_url=/ArticleRead.nhn%3Farticleid=21284
· 4. http://blog.naver.com/pow1987?Redirect=Log&logNo=52881957