1. Title
2. Object
3. 1) Reagent and Apparatus
2) Experimental Procedure
4. Theory
5.Result and Discussion
6. Conclusion
본문내용
1. Title : 세포생장에 미치는 pH 영향
2. Object : 미생물생장에 영향을 미치는 요소는 여러 가지가 있다. 그 중 액체배양에서 미생물 생장에 미치는 pH 영향을 측정한다.
3. 1) Reagent and Apparatus : 균주(액체배지에서 18~24시간 배양된 균주), Loop(백금이), Alcohol lamp, 삼각플라스크, spectrophotometer, semi-log 용지, zip lock pack
2) Experimental Procedure
① 삼각플라스크에 액체배지(50ml)를 넣고 대장균(E.coli)를 접종한다.
② 오전 10시부터 2시간 간격으로 오후 10시까지 매 시간 각각 1ml을 sampling하고 다음 날 오전 10시 그리고 오전 12시에 마지막 sampling을 실시한다. (1ml씩)그 배양액의 세포농도를 평판배지를 이용하여 측정한다.
( 각 조원은 sampling을 위해 서로 상의 후 1명씩 시간을 정하여 전원이 돌아가면서 sampling을 실시한다. )
③ 위 3번에서 취한 sampling은 마이크로 튜브에 넣고 시간과 실험조 번호를 적은 후 zip lock pack에 넣어 냉장 보관한다.
④ 마지막 sampling후 각각의 sampling을 적당히 희석(희석배수를 알아둘 것)하고 spectrophotometer를 이용하여 O.D.(optical density-600 ㎚)를 측정한다.
⑤ 측정한 O.D. 값을 이용하여 O.D. 대 시간(t)의 생장곡선을 그린다.
(ln O.D. vs t, semi-log 용지)
⑥ 위에서 구한 semi-log plot 상의 생장곡선의 직선부분을 이용하여 세포 생장속도(μ)를 구한다.
위 식을 이용하여 μ값을 구한다.
4. Theory
세포생장에 미치는 pH 영향
균의 종류에 따라 성장이 가능한 pH 범위와 최적 pH 값이 다르다. 자연 환경은 보통 pH5-9 범위이므로, 대부분의 미생물이 이 범위 안에서 성장하는 것이 보통이지만, pH 3-5 에서 잘 자라는 호산성균과 pH 10 이상에서 자라는 호염기성균도 있다. 대개 세균은 중성이나 약 알카리에서 잘 증식하는데 비해 효모나 곰팡이는 pH 5-6 의 약산성 배지에서 잘 자란다. 미생물은 증식하면서 자기가 처한 환경의 pH를 변화시키는 것도 있어서 수시로 배지의 pH 가 균의 성장에 적합한지 살펴야 한다.
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