[생화학실험] 단백질 전기영동,SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis of Proteins

소개

[생화학실험]단백질 전기영동, SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis of Proteins

보고서 입니다. 원리 및 실험방법의 자세한 설명이 되어 있으니 많은 참고 바랍니다.

목차

1.실험목표
2.실험 원리
1> Electrophoresis 전기영동
2>이동속도에 영향을 주는 요인
3>전기 이동법의 종류
4> SDS-PAGE (SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)
5>불연속 겔 전기 이동법(disc-gel electrophoresis)
3.시약 및 기구
<용액 만들기>

본문내용

1.실험목표
단백질의 전기영동을 통해 분석하고자하는 단백질의 크기를 분리 한다.

2.실험 원리
1> Electrophoresis 전기영동
전류가 흐르는 용액 중에서 전하를 가진 분자는 각 전극으로 이동하는데, 이와 같은 현상은 극이 서로 다르면 잡아당기기 때문에 양전하를 가진 분자(양이온)는 음극으로 향하고 음전하를 가진 분자(음이온)는 양극으로 향하게 된다. 즉, 분자의 전하량, 분자의 크기에 따라 이동하는 속도가 다른 점을 이용하여 분리, 분석하는 것이다.
단백질이나 핵산 등의 고분자물질은 하전을 띄므로 이를 기초로 하여 이들 분자를 전기장을 띤 매질(겔)에서 이동 분리시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법을 전기영동(electrophoresis)라 한다.
단백질의 전기영동은 일반적으로 아크릴아마이드(acrylamide)를 비스아크릴아마이드로 결합시킨 중합체인 폴리아크릴아미드 겔(polyacrylamide gel)을 가장 많이 사용한다. 이 폴리아크릴아미드 젤의 농도가 증가할수록 구멍의 크기가 작아지므로 분리하고자 하는 단백질의 분자량을 알아서 폴리아크릴아미드 겔의 농도를 정한다.

Acrylamide를 가교제 (cross-linker)로 중합한 polyacrylamide gel은 acrylamide와 가교제의 농도 및 비율에 의해 gel내 미세통로의 크기를 조절할 수 있어 다양한 크기의 생체 분자들을 분리할 수 있을 뿐만 아니라 높은 정밀도와 고분해능으로 인해 오래 전부터 단백질, 핵산 등의 분리에 널리 사용돼 왔다.
Polyacrylamide gel은 acrylamide 측쇄 기능기가 N,N`-methylene bisacrylamide와 같은 2개의 기능기를 가지는 화합물에 의해 비가역적으로 중합되어 형성된 polymer이다.

참고자료

· 없음