[인천대 생명공학실험2 A+] DNA gel extraction, agarose gel extraction 전기영동 실험결과 보고서
- 최초 등록일
- 2020.03.08
- 최종 저작일
- 2019.04
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소개글
실제로 A+를 받았고, A+를 쉽게 받을 수 있도록 매우 정리가 잘 되어 있는 DNA gel extraction, agarose gel extraction 전기영동 실험결과 보고서 입니다.
DNA 전기영동(DNA electrophoresis) 및 1X TAE, Marker, 6X Loading dye, Safe Nucleic Acid Gel Stain, DNA extraction 및 buffer, Nano drop에 대한 이론을 포함하고 있습니다.
이론 외에 실험결과와 오차의 원인까지 포함한 고찰 및 결론 또한 체계적으로 꼼꼼히 적혀있습니다.
목차
1. Abstract
2. Objective
3. Introduction
4. Materials and Methods
5. Result
6. Discussion
7. Conclusion
8. Reference
본문내용
DNA electrophoresis(DNA 전기영동): 1x TAE 30ml과 0.24g agarose(아가로스)을 이용해 0.8% agarose gel(아가로스 젤)을 만든후 microwave에서 약 2분간 둔 후 Safe Nucleic Acid Gel Stain 1.5㎕를 넣어 casting unit에 붓는다. PCR product 35㎕와 6X loading dye 7㎕를 parafilm 위에서 섞은 후 이 sample 40㎕와 maker 5㎕ 를 load하여 전기영동을 준비한다. 150V에서 20-35분간 전기영동한 후 UV illuminator를 이용해 DNA band를 확인하고 사진 찍는다. DNA gel extraction: E-tube, DNA insert를 넣은 E-tube무게를 재고 차를 이용해 DNA insert의 질 량을 잰 후 300g이 넘지 않을 경우 600㎕의 DF buffer를 넣고 vortex한다. incubator에서 15분간 incubate하며 3분마다 invert하고 sample을 상온에서 식힌 후 2ml tube에 column을 끼우고 sample 800㎕를 넣고 13000rpm에서 30초간 원심 분리한다. 아래 용액을 버리고 column에 600㎕ wash buffer(EtOH)를 넣고 1분 후 13000rpm에서 30초간 원심분리하고...... <중 략>
참고 자료
Michael T. et al., Brock의 미생물학 11th, PEARSON 402-403
Reece et al., Campbell Biology Concept&Connection, 2011, PEARSON, p 21, 27,29, 442,443
Joanne M. Willey et al., Prescott’s Microbiology 9th, 2016,라이프사이언스, p 111-113, 192, 357