소개글
"hemocytometer 원리"에 대한 내용입니다.
목차
1. 실험원리
1.1. Spread plate method / direct count by hemocytometer
1.2. Disinfectants on microorganism & Kirby-bauer disk method
2. 실험결과
2.1. Spread plate method
2.2. Direct count by hemocytometer
2.3. Disinfectants on microorganism & Kirby-bauer disk method
3. 고찰
3.1. Spread plate method / direct count by hemocytometer
3.2. Disinfectants on microorganism & Kirby-bauer disk method
4. 참고 문헌
본문내용
1. 실험원리
1.1. Spread plate method / direct count by hemocytometer
식품에 있는 미생물을 수를 세서 변질 또는 오염의 위험이 있는지 아닌지를 판단할 수 있다. 세균 수를 세는 방법에 여러 가지가 있는데 그 중에서 균을 배양해서 직접 세는 spread plate method와, 현미경과 hemocytometer을 이용해서 직접 세는 방법을 이용해서 세균 수를 세었다.
spread plate method는 Micrococcus luteus 균액(A)를 희석해서 B, C, D 균액을 만들고 각각을 0.1mL 도말한 후 배양한 결과이다. A, B는 균이 너무 많이 자라서 셀 수 없었고 C와 D의 균의 개수를 세서 CFU (colony forming unit)를 계산했다. C의 colony는 약 1000개, D의 colony는 36개이다. CFU를 계산한 결과, C에서는 10 x 10^7 CFU/mL, D에서는 36 x 10^7 CFU/mL의 균이 colony를 형성함을 알 수 있다.
한편 direct count by hemocytometer 방법으로 균액 D 10 mL를 counting chamber에 넣고 현미경으로 관찰한 결과, 19 x 10^6 cells/mL의 균도가 확인되었다. 이는 spread plate method에서 구한 결과와 큰 차이가 난다.
spread plate method와 hemocytometer를 이용해 구한 세균 수에서 차이가 난 이유는, spread plate method에서는 배양을 해서 개수를 세었기 때문에 살아있는 균만 셀 수 있었지만, hemocytometer을 이용했을 때는 살아있는 것과 죽어있는 균을 모두 세었기 때문이다. 또한 현미경으로 세균을 관찰할 때 먼지인지 균인지 구분이 잘 가지 않았고, 개수를 세서 평균을 낸다고 해도 counting chamber에 균이 균일하게 들어가지 않았을 수도 있다. 이러한 요인들로 인해 두 방법 간의 세균 수 차이가 발생했다고 볼 수 있다.
1.2. Disinfectants on microorganism & Kirby-bauer disk method
소독제(disinfectants)는 병원미생물을 사멸시키기 위해 인체의 피부, 점막의 표면이나 기구, 환경의 소독을 목적으로 사용하는 화학물질을 총칭하며 정균 작용보다는 살균작용을 나타낸다. 감염증의 진단과 치료에 있어서 가장 효과적인 항균제의 선택은 매우 중요한데 그 중에 가장 널리 쓰이는 것이 Kirby-Bauer 법이다. 각각의 항생물질의 양을 달리해서 다른 균에 처리한 후 각각의 항생제가 농도에 따라 균에 미치는 영향을 알아볼 수 있다. 디스크에서 멀리 떨어질수록 항생제 농도가 낮아지므로 디스크에서 멀리 떨어진 곳에도 균이 자라지 않게 되면 적은 양으로도 효과를 볼 수 있는 좋은 항생제라 할 수 있다. 실험을 통해 디스크에서 가까우면 세균이 자라지 않고 멀어지면 항생제 농도가 낮아져서 세균이 자라는 것을 확인할 수 있었다. 아쉬웠던 점은 Micrococcus luteus의 경우 도말이 골고루 되지 않아서 항생제가 없는 부분에도 세균이 자라지 않았지만, 이를 제외하고는 항생제가 농도에 비례해서 효과를 보이는 것을 관찰할 수 있었다.
2. 실험결과
2.1. Spread plate method
식품에 있는 미생물을 수를 세서 변질 또는 오염의 위험이 있는지 아닌지를 판단할 수 있다. 세균 수를 세는 방법에 여러 가지가 있는데 그 중에서 균을 배양해서 직접 세는 spread plate method가 있다.
spread plate method는 식품 내 미생물의 수를 측정하는 방법이다. 식품 시료를 적절히 희석한 후 배지에 도말하여 미생물을 배양한다. 배양 후 형성된 colony의 개수를 세어 colony forming unit(CFU)를 계산한다. CFU는 1mL 당 colony를 형성하는 균의 수를 의미한다.
시료 A를 100배 희석하여 B, C, D 시료를 만들고 각각 0.1mL씩 도말한 결과, A와 B의 균이 너무 많이 자라서 셀 수 없었다. 하지만 C와 D에...
참고 자료
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