DNA 제한효소 예비보고서

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목차

Ⅰ. 실험목표

Ⅱ. 이론
1. 제한효소
2. 겔 전기 영동법

Ⅲ. 실험방법

본문내용

Ⅰ. 실험목표
Lambda DNA를 임의의 제한효소로 절단하고, 이를 전기영동 통해 사용된 제한효소의 기작 및 DNA의 대략적인 구조를 분석한다.

Ⅱ. 이론
- 제한효소
제한효소 또는 제한 내부헥산 가수분해 효소는 이중 가닥 DNA 분자의 특정한 염기서열을 인식하여 그 부분이나 그 주변을 절단하는 것을 촉진시키는 효소를 지칭한다. 대부분의 제한 효소는 각각 인식자리 혹은 제한 자리라는 특수한 염기서열을 가진 위치에서 DNA를 절단한다. 원래 제한 효소는 세균이 bacteriophase라는 바이러스의 공격을 받으면 생산하는 효소로, 바이러스의 침입으로부터 자신을 방어하는 역할을 한다.

제한 효소는 소단위체(subunit)의 구성 형태, 절단 위치, 절단 서열의 모양, 필요한 조효소 유무에 따라 3가지로 나눌 수 있다. Ⅱ형은 가장 많이 쓰이는 형태로 8개의 소분류로 나뉜다.
- Ⅰ형
제한 효소와 메틸화효소가 뭉쳐져 있고, 인식자리와 제한 자리가 서로 다르다. 염기서열은 특이적으로 인식하지만, 인식자리에서 약 1000개 염기 정도 떨어진 곳에서 비특이적으로 DNA를 자른다. 또한 활성에 ATP나 S-아데노실메티오닌, 마그네슘이온등을 필요로 한다. DNA 절단 위치의 특이성이 없기 때문에 실험 목적으로는 거의 사용하지 않는다.

참고 자료

제한효소
‘제한효소’, 두산백과
강영희, 생명과학대사전, ‘제한효소’, 2014, 여초
한국식품과학회, ‘제한효소’, 식품과학 기술대사전, 광일문화사
겔전기영동법
Berg JM, Tymoczko JL Stryer L (2002). Biochemistry (5th ed.). WH Freeman. ISBN 0-7167-4955-6.
Pulves 외, 이광웅 외 역, 생명 생물의 과학, 2008, 교보문고, ISBN 978-89-7085-798-5, 309-311쪽