A+보장, 생화학 Enzyme assay 결과레포트
- 최초 등록일
- 2019.12.25
- 최종 저작일
- 2019.03
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소개글
약학대학 과정의 생화학 실험 레포트입니다.
(다른 자연과학 생화학 실험의 과정과 거의 유사합니다.)
긴말하지 않겠습니다.
A+ 받았던 결과보고서 입니다.
받아보시면 후회하지 않으실겁니다.
목차
1. Background & Study Aim
2. Materials & Apparatus
3. Procedure
4. Results
5. Discussion
6. References
본문내용
1. Background & Study Aim
1) Background
Q. Protein 정량법의 종류와 원리 (Assignment 1.)
⓵ UV spectrophotometry
Quantitation of the amount of protein in a solution is possible in a simple spectrometer. Absorption of radiation in the near UV by proteins depends on the Tyr and Trp content (and to a very small extent on the amount of Phe and disulfide bonds). Therefore the A280 varies greatly between different proteins (for a 1 mg/mL solution, from 0 up to 4 [for some tyrosine-rich wool proteins], although most values are in the range 0.5–1.5).
<원리>
- Phe, Tyr, Trp 같은 Aromatic R groups는 280nm의 자외선을 흡수한다.
(그 외 amino acid는 자외선 흡수율이 낮음.)
- 280 nm 에서의 흡광도는 단백질의 농도에 비례함.
<장점 및 단점>
장점 : 간단하다. sample이 recoverable하다. 측정이 빠르고 단백질 변성이 없음.
50 ug - 1 mg 범위의 단백질양의 측정이 가능.
단점 : buffer, pH, salt, purines, pyrimidines, nucleic acids 등에 영향을 받음.
아미노산 조성에 따라 값이 달라짐.
⓶ Biuret method
Biuret test는 chemical test로 펩티드 결합을 detecting하는 데에 사용되는 방법이다. 알칼리 용액에서 구리 2가 이온은 peptide bond와 바이올렛 색의 coordination complex를 형성하는데, 이 뷰렛 시험을 기반으로 한 BCA test나 Modified Lowry test가 고안되었다.
참고 자료
Protein 정량법의 종류와 원리 (Assignment 1.) http://biochem.yonsei.ac.kr/board/lib/down.php?boardid=board_Etc&no=70&num=1
UV spectrophotometry http://en.wikipedia.org/wiki/Ultraviolet-visible_spectroscopy
Biuret method : http://en.wikipedia.org/wiki/Biuret_test
BCA method : http://en.wikipedia.org/wiki/Bicinchoninic_acid_assay
Lowry Method : http://en.wikipedia.org/wiki/Lowry_protein_assay
Bradford method : http://en.wikipedia.org/wiki/Bradford_protein_assay
Lysis buffer의 조성과 원리 (Assignment 2.) http://en.wikipedia.org/wiki/Lysis_buffer, http://blog.daum.net/sunny224/8042247
